如何用辨识幽门螺杆菌?


1994 年国际癌症研究机构(IARC)将幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)列为Ⅰ类致癌因子,现已证实 HP 感染是“慢性非萎缩性胃炎→萎缩性胃炎→肠上皮化生→异型增生→胃癌”这一演变过程的始动因素。一旦感染 HP,若不经治疗,便难以自愈。约10%~15% 的 HP 感染者可发展为消化性溃疡,约50% 可发生胃黏膜萎缩,2%~3% 的 HP 感染者将发展为胃恶性肿瘤。此外,HP 感染也与一些胃肠外的疾病发生有关,如不明原因缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜等,这些疾病已被推荐作为根除 HP 的指征。若要根除HP,关键在于“早发现”,那如何辨识 HP 呢?

幽门螺杆菌HP检查方法由来

如何用辨识幽门螺杆菌?

1984年,一位科学家发现幽门螺杆菌能够产生大量的“尿素酶”,这种物质能水解尿素,生成氨和二氧化碳,氨能在菌体周围形成一层保护罩,中和胃酸,使局部的pH升高,便于HP生长繁殖,引发疾病。根据这一特点,科学家们开发出了一系列关于HP的检测方法。常用的方法包括胃镜、呼气试验和快速尿素酶试验等。

1、内镜检测Hp

内镜检查是最常用的Hp诊断方法之一,常见于胃镜,常被用于Hp相关的消化性溃疡、萎缩性胃炎、胃黏膜淋巴组织相关淋巴瘤等疾病的诊断。同时,内镜检查也可为后续的其他侵入性检查方法取得胃黏膜组织样本,如快速脲酶试验、组织学检查、分离培养等。除了临床常用的常规内镜外,还有酚红染色内镜、靛蓝染色的放大内镜和激光共聚焦显微内镜等。在内镜下取出一小块组织,可进行以下试验:

如何用辨识幽门螺杆菌?

(1)快速尿素酶试验

该试验具有廉价、快速、简单、高特异性、原料获取方便等优点,是诊断Hp感染颇具实用性的侵入性检查。

(2)组织学检查

该检查是首个被用于Hp感染检测的检查方法,通常被认为是Hp感染直接检查中的“金标准”,是最主要的检验方法之一。镜下典型的细菌形态伴有炎症的组织切片可以作为Hp感染的诊断指标。影响组织学检查诊断准确性的因素包括取材的部位、样本大小和数量、染色方法、质子泵抑制剂(PPI)或抗菌药物的运用、病理医生的经验等。

(3)分离培养

从胃组织活检样本中分离培养Hp是一种特异性很高(接近100%)的方法。

优点:

  • 可基于Hp形态学、脲酶阳性、过氧化物酶阳性、氧化酶阳性的特点进行鉴别诊断;
  • 能进行抗菌药物的敏感性试验。此外,分离培养可得到供后续表型和基因型特征分析试验用的Hp单个菌株,从而能更好地理解其病理特征,为临床治疗提供依据其在临床应用中具有独特的优势。

缺点:

  • 成本昂贵、耗时长;
  • 样本状况不合格、延迟运送、暴露于氧气环境、转运温度改变或分离培养过程中操作不当等都会影响诊断的准确性。

同位素标记(UBT)——呼气试验

如何用辨识幽门螺杆菌?

同位素标记在临床上已经应用了接近30年,直至今日,仍是诊断Hp感染最常用的非侵入性试验,并用于Hp流行病学调查和根除治疗的疗效评估。目前,临床常用的13C-UBT和14C-UBT在诊断准确性上并无差异。13C为一种稳定同位素,在自然界以特定的比例天然存在,适用于所有年龄和类型的受试者,包括孕妇和儿童。国内外公认其在诊断Hp感染及判断Hp根除疗效中具有高度的准确性,但价格较贵。同样原理的14C检测价格便宜,但有放射性,不能用于孕妇及近期准备怀孕的人群和儿童。呼气试验要求空腹,而且如果近期用过药物也会干扰检测结果。

检查前受检者需空腹三个小时,口服一颗胶囊,半小时后呼三口气留取样本,就能较准确地检测出是否存在幽门螺杆菌感染。为避免出现“假阴性”结果(即原本有的却没检测出来),患者需要在试验前2 周停用PPI或在试验前4周停用抗菌药物;患者的出血症状会造成UBT的假阴性结果,而胃中其他产尿素酶的病原体的存在也会导致“假阳性”结果(即原本没有的却被检测出来)。

优点:方便、准确率高、无痛苦、能较准确地检测出是否存在幽门螺杆菌感染。

缺点:

  • 14C有放射性,不能用于孕妇及近期准备怀孕的人群和儿童;
  • 结果易受假阴性、假阳性干扰。

血清学检测

如何用辨识幽门螺杆菌?

适用于体检筛查及以下四种人群:正在(四周内)应用质子泵抑制剂、铋剂或者抗生素的受检者(质子泵抑制剂、铋剂在治疗胃部疾病时被普遍使用);消化性溃疡合并出血者;萎缩性胃炎者;胃MALT淋巴瘤者。

优点:

  • 采用静脉抽血,没有放射性;
  • 与现症阶段感染有高度相关性,有大量基于抗Hp IgG抗体的血清学试验被用于Hp感染的诊断;
  • 廉价、快速、易于被患者接受;
  • 诊断准确性不受溃疡出血、胃萎缩和抗菌药物或PPI使用的影响。

缺点:

  • 仍不能被作为Hp感染的首选诊断试验;
  • 由于其抗体效价在根治成功后仍能维持很长时间,故不能用于评估根治疗法的疗效,也不能区分Hp的近期感染和既往感染。

PCR 基因检测技术

PCR 是一种基因检测技术,被广泛地用于检测来自胃组织、粪便、胃分泌物以及其他样本中的Hp。

优点:

  • 相比其他常规的检测方法,PCR拥有着超过95%的特异性和敏感性;
  • 在检测消化道出血患者的Hp时能得出更准确的结果;
  • 样本中需要的原始菌量少、检测快速、无需特殊处理或转运流程,能帮助临床医生在诊疗时作出更快、更准确的判断;
  • 运用PCR检测粪便中的Hp是可靠、方便的方法,尤其对于儿童来说。粪便PCR也有着能鉴别特定基因型以及对抗菌药物耐药性的优点;
  • 快速脲酶试验和分离培养的方法常常在早期的研究中被用于检测口腔Hp,而PCR是近期试验中最为常用和可靠的方法;
  • PCR对流行病学调查中环境样本Hp的检测也有着很大的帮助。运用PCR检测Hp能提供更多通过饮用水传播的Hp信息。在未洗净的蔬菜上污染Hp的高检出率也提示了洗净蔬菜能减少Hp的污染。

缺点:

成本高、试验设备复杂等都影响着PCR在临床的应用。

肽核酸荧光原位杂交(PNA-FISH)

是一种兼具高敏感性( 97% )和高特异性(100%)的检测技术,其快速、准确、价格适宜,可检测胃组织样本中是否存在对克拉霉素耐药的Hp,还可检测常规形态学检查中易被漏检的Hp球形体。目前尚无检测Hp的金标准方法,选择适合的 Hp 检测方法取决于当地流行的Hp、每种方法的优缺点与可操作性以及每例患者独特的临床表现等。在临床上,结合2种或2种以上检测方法以获取最可靠的结果常常是个不错的选择。

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